Test transformácie lymfocytov (LTT)

Test transformácie lymfocytov (LTT) bol vyvinutý v 60. rokoch a primárne sa používa v alergologickej diagnostike. Test LTT sa tiež použil pri diagnostike chronických infekcií Borrelia burgdorferi, ktoré sú pôvodcami lymskej boreliózy. Test je obzvlášť dôležitý, ak existujú ťažkosti s diagnostikovaním ochorenia. Čo je to test LTT a ako interpretovať jeho výsledky?

Obsah:

1. Aplikácia testu transformácie lymfocytov (LTT)
2. Test transformácie lymfocytov (LTT) - lymská borelióza
3. Test transformácie lymfocytov (LTT) - čo to je?
4. Test transformácie lymfocytov (LTT) - výsledky

Test transformácie lymfocytov (LTT) bol prvýkrát opísaný v roku 1960.

Test sa v súčasnosti používa vo výskume a ako diagnostický nástroj v rôznych oblastiach medicíny, hlavne v alergológii.

Aplikácia testu transformácie lymfocytov (LTT)

Test LTT sa použil v:

• hodnotenie porúch imunitného systému, napr. prejavujúcich sa zvýšenou náchylnosťou k infekciám
• diagnostika chronických bakteriálnych (Borrelia, Chlamydia, Yersinia), protozoálnych (Giardia lamblia) a vírusových (herpesvírusov) infekcií
• diagnostika precitlivenosti (alergie) typu IV závislá od T lymfocytov na lieky, kovy, prísady do potravín, plesne, potraviny (napr. lepok); Test LTT sa používal najmä pri detekcii alergií na dentálne materiály, ako sú zubné protézy a plomby

Test transformácie lymfocytov (LTT) - lymská borelióza

Diagnostické ťažkosti spojené s diagnostikou lymskej boreliózy nútia špecialistov hľadať iné ako odporúčané laboratórne testy. Jedným z nich je test LTT. Verí sa, že test LTT môže byť užitočný pri:

• potvrdenie aktívnej infekcie u ľudí s pozitívnymi výsledkami sérologických testov, ale bez príznakov svedčiacich pre lymskú boreliózu
• potvrdenie aktívnej infekcie u jedincov s negatívnymi alebo hraničnými sérologickými testami, ale s klinickými príznakmi lymskej boreliózy
• sledovanie účinnosti antibiotickej liečby
• hodnotenie recidívy lymskej boreliózy

Je však potrebné mať na pamäti, že test LTT nie je odporúčaným testom pri diagnostike lymskej boreliózy Národnou komorou laboratórnych diagnostikov, Národným ústavom verejného zdravia a národným konzultantom v oblasti infekčných chorôb, pretože tento test si v tomto prípade stále vyžaduje validáciu (t. J. Potvrdenie jeho dôveryhodnosti). entita choroby.

• Lymská borelióza - výskum boreliózy. Má test na kliešte zmysel?

Prečítajte si tiež: Test ELISA - čo zistí? Ako čítať výsledky? Cena testu Western Blot a lymskej boreliózy. Interpretácia výsledkov testovania PCR (testovanie) - aplikácia. Aká je technika PCR?

Test transformácie lymfocytov (LTT) - čo to je?

Test spočíva v hodnotení reaktivity buniek imunitného systému (T buniek imunitnej pamäte) na testovaný antigén / alergén, napríklad liečivo, bakteriálny proteín. Imunitné bunky reagujú na daný antigén / alergén po predchádzajúcom kontakte (odtiaľ termín imunitná pamäť T bunky).

Pre test LTT sa bunky získavajú z pacientovej periférnej krvi odobratej z žily. Potom sa v laboratóriu oddelia od krvi jednotlivé bunkové frakcie, a to mononukleárne bunky (lymfocyty a monocyty).

Izolované bunky sa potom pestujú za vhodných podmienok a potom sa stimulujú špecifickým antigénom / alergénom. Ak s ňou bunky boli v kontakte, začali sa deliť a potom sa merala intenzita týchto delení.

Jednotlivé modifikácie testu LTT merajú koncový bod bunkového delenia odlišne a je možné ich vyhodnotiť nepriamo meraním:

• produkcia signálnych molekúl, ako je interferón-gama (INF-y), ktoré sú produkované delením buniek; iný názov pre túto modifikáciu testu LTT je EliSpot
• aktivita receptora na povrchu deliacich sa buniek, napríklad CD25, CD69, HLA-DR
• množstvo DNA vytvorenej počas fázy syntézy, ktoré sa nachádza iba v antigénom / alergénom stimulovaných, deliacich sa T bunkách; na tento účel sú novo syntetizované reťazce DNA označené napríklad 3H-tymidínom, ktorý je potom detekovaný špeciálnym počítačom

Test sa vykonáva v troch alebo štyroch opakovaniach, aby sa zvýšila spoľahlivosť získaného výsledku.

Mali by ste vedieť

Test LTT je veľmi náročný laboratórny test. Vyžaduje drahé a moderné laboratórne vybavenie a skúsenosti personálu, ktorý skúšku vykonáva.

Z tohto dôvodu by sa test mal vykonávať iba v strediskách, ktoré majú skúsenosti s vykonávaním testu LTT.

Test transformácie lymfocytov (LTT) - výsledky

Pozitívny výsledok testu LTT naznačuje prítomnosť imunitných pamäťových T lymfocytov v krvi, ktoré boli predtým v kontakte s testovaným antigénom / alergénom. Čo môže naznačovať príčinnú súvislosť medzi študovaným faktorom a pacientovými príznakmi.

Výsledok testu obsahuje číselné hodnoty vyjadrené ako index stimulácie (SI). SI vyjadruje intenzitu delenia imunitných buniek v porovnaní s negatívnou kontrolou, čo sú v tomto prípade imunitné bunky, ktoré neboli stimulované antigénom / alergénom.

Skóre SI menšie ako 1 sa považuje za negatívne, skóre medzi 2 a 3 je slabo pozitívne (hraničné) a skóre väčšie ako 3 sa považuje za pozitívne.

Dôležité

Aké faktory môžu ovplyvniť výsledok LTT?

Užívanie liekov, ktoré znižujú aktivitu imunitného systému, napríklad steroidov (metotrexát, prednizón), môže znížiť schopnosť buniek deliť sa v bunkovej kultúre a / alebo produkovať cytokíny bunkami.

Literatúra

1. https://www.xenodiagnostics.com/lymphocyte-transformation-test.html
2. Pichler W. J. a Tilch J. Test transformácie lymfocytov v diagnostike precitlivenosti na lieky. Alergia. 2004 august; 59 (8): 809-20.
3. Rychlik U. a kol. Laboratórna diagnostika testu transformácie lymfocytov (LTT). Journal of Laboratory Diagnostics 2013, 49 (4); 425-428.
4. Laboratórna diagnostika chorôb prenášaných kliešťami. Odporúčania pracovnej skupiny: Národná komora laboratórnych diagnostikov, Národný ústav verejného zdravotníctva - Národný ústav hygieny, Národný konzultant v oblasti infekčných chorôb, Ústav infekčných chorôb a neuroinfekcií, Lekárska univerzita v Białystoku, Poľská virologická spoločnosť, Varšava 2014.

Karolina Karabin, MD, PhD, molekulárna biologička, laboratórna diagnostička, Cambridge Diagnostics Polska. Biologička so špecializáciou na mikrobiológiu a laboratórna diagnostika s viac ako 10-ročnými skúsenosťami v laboratórnej práci. Absolvent Vysokej školy molekulárnej medicíny a člen Poľskej spoločnosti pre genetiku človeka. Vedúci výskumných grantov v Laboratóriu molekulárnej diagnostiky na Katedre hematológie, onkológie a vnútorných chorôb Lekárskej univerzity vo Varšave. Na 1. lekárskej fakulte Lekárskej univerzity vo Varšave obhájila titul doktor lekárskych vied v odbore lekárska biológia. Autor mnohých vedeckých a populárno-vedeckých prác v oblasti laboratórnej diagnostiky, molekulárnej biológie a výživy. Denne ako špecialista v oblasti laboratórnej diagnostiky vedie testovacie oddelenie v spoločnosti Cambridge Diagnostics Polska a spolupracuje s tímom dietológov na CD Dietary Clinic. O svoje praktické poznatky z diagnostiky a dietoterapie chorôb sa delí s odborníkmi na konferenciách, školeniach, v časopisoch a na webových stránkach. Zaujíma ju najmä vplyv moderného životného štýlu na molekulárne procesy v tele.